RESUMEN: PROTEIN KINASE C.

Jussi K,  Vesa A,  Sanna K,  Petri L, Matti L and Juha Peltonen. Protein Kinase a/b Inhibitor Go6976 Promotes Formation of Cell Junctions and Inhibits Invasion of Urinary Bladder Carcinoma Cells. 2004. Cancer Research. 64(1) 5693–5701.

La familia de la Proteína Cinasa C (PKC) consiste en una serie de cinasas serina-treonina que actúan fosforilando sustratos especificos de proteínas. Los miembos de la famila PKC se clasifican en 3 grupos princiaples: clásicas (a y b y g), nuevas ( d, e, h y q) y atípicas ( m, ja y x). La activación de las enzimas clásicas depende de la acción del calcio y los fosfolipidos; las enzimas nuevas son activadas por fosfolipidos y la activación de las atípicas son independientes de calcio y fosfolipidos. Las PKC´s están involucradas en procesos tales como: regulación, expresión génica, proliferación, uniones celulares, apoptosis y migración.

Las PKC´s están asociadas en la progresión del cáncer, ya que se ha observado en dos estados de modelos de carcinogénesis que la mayoría de los promotores tumorales son activados por la PKC. Esto asegura que diferentes isoenzimas de PKC tienen efectos opuestos sobre la progresión de cáncer. Específicamente PKC se ha relaionado en este padecimiento porque se ha observado que incrementa la poliferación y la migración celular, además de inhibir la apoptosis.  En lo que a PKCd  respecta se cree que tiene efectos opuestos sobre la progresión del cáncer ya que promueve la apoptosis. Lo anterior sugiere que que la inhibición de PKCa y la activación de PKCd puede usarse como terapia en cáncer. Los inhibidores específicos de las isoenzimas PKC´s así como Go6976 (inhibidor de PKCa/b) y el safingol (inhibidor de  PCKa) han mostrado ser drogas terapéuticas efectivas contra el cáncer en cultivos celulares y modelos animales. Por otra parte los inhibidores específicos de las isoenzimas específicas PKC parecen ser los inhibidores con mayor eficacia contra el cáncer a diferencia de los inhibidores de amplio espectro. Por tanto la activación de la PKC asegura un balance y/o equilibrio contra el cáncer.

El presente estudio investigó el efecto de diferentes inhibidores de la PKC en uniones en lineas de cultivo celular 5637 y T24 en células de carcinoma de vejiga urinaria. La exposición de las células a los inhibidores de la isoenzima específica de PKC mostraron variables resultados: Go6976, un inhibidor de las isoenzimas PKCa y PKCb, inducen un agrupamiento rápido de las células cancerosas cultivadas y la formación de un mayor número de desmosomas y uniones adherentes. Safingol, un inhibidor de PKCa tuvo efectos similares pero menos pronunciados. Por el contrario, un inhibidor de la PKCd, tuvo un efecto contrario en la agrupación de células y en la disociación de las uniones celulares. Bisindolilmaleimida un inhibidor de amplio espectro de la PKC no tuvo ningún efecto aparente sobre la morfología de los cultivos ni en el número de uniones celulares. Figura 1.



Figura 1. Go6976 promueve la formación de desmosomas y uniones adherentes en los cultivos celulaes de TCC. Las líneas celulares 5637 y T24 fueron incubadas con (Go 4 horas) o sin (cont) 1 uM (Go6976) fijadas durante 4 horas. A. La Inmunofluorescencia de células marcadas con anticuerpo pan-cadherina (Cd) o desmoplaquina (DP). B. Micrografía electrónica de las células tratadas con Go6976 como en A. el control de las células de ambas líneas celulares muestran numerosas uniones adherentes (Flechas), pero pocos desmosomas. Después del tratamiento con Go6976 durante 4 horas, muestran prominentes desmosomas (puntas de flecha) observados en ambas líneas celulares.

 

Con base en los resultados obtenidos se puede concluir que en células de carcinoma de vejiga urinaria, Go6976 es un fármaco anticancerígeno potencial contra el cáncer debido a sus efectos sobre uniones célula-célula, célula-matriz, migración e invasión celular. Además, los resultados explican que los cambios en el balance de la PKC son promovidos por la inhibición de la PKCa/b.